1 Yleistä
3 Asennus
4.e Retikulosyytit
4.f Trombosyytit
4.g DiffAcademy
5 (HOME)
HemoDiff-ohjelma on kehitetty osaksi korvaamaan ja osaksi täydentämään tavanomaisia hematologian laboratorion manuaalisia erittelylaskimia, jotka ovat sekä kalliitta suorituskykyyn nähden että rajoittuneita, jos laskimelta halutaan myös apua tulkintoihin, tulostukseen ja tallennukseen. Toisaalta lähes jokaisessa kliinisessä laboratoriossa on grafiikkapohjainen tietokone, jolloin on luonnollista, että näitä laitteita tulisi pyrkiä käyttämään mahdollisimman monipuolisesti. Vanhempien tietokoneiden kapasiteetti ei riitä nykyisten suurten ohjelmien käyttöön, jolloin ne saattavat jäädä vajaakäyttöön tai niiden hävittämistä harkitaan.
HemoDiff-ohjelma on kuitenkin tarpeeksi pieni, jotta vanhakin laitteisto kelpaa ohjelman suorittamiseen. Käytännössä voidaan sanoa, että vuoden 1992 jälkeen markkinoille tulleet mustavalko- ja värinäytöllä varustetut tietokoneet riittävät suorituskyvyltään tähän. Älä siis hävitä vanhaa kannettavaasi!
Ohjelmassa on myös kiinnitetty huomiota erittelylaskennan opetukseen Academy-osassa.
HemoDiff-ohjelma vaatii laitteistolta vähintään Microsoft Windows 3.1/3.11 käyttöympäristön. Ohjelma on kirjoitettu 16-bittisellä kielellä, mutta toimii myös kaikissa testatuissa 32-bittisissä käyttöjärjestelmissä (Win95/98/NT). Koska Win95 käyttöjärjestelmiä on myynnissä 5 eri versiota, saattaa olla, että ohjelma ei toimi jossakin Win95-järjestelmässä. Tämä selviää vain kokeilemalla.
Laitteistoksi riittää jo esim. Intel 386 ja keskusmuistia tarvitaan vain 1 Mt. Näytöksi riittää 16 värin VGA-näyttö, mutta myös kannettavan pelkkä mustavalkonäyttö riittää, jos tyydyt vain diffikäyttöön, jolloin solujen yksityiskohdat jäävät pois. Levytilaa tarvitaan n. 1,4 Mt eli yhden tavallisen levykkeen verran. Laitteisto toimii pelkällä näppäimistöllä, mutta hiirtä voi käyttää liikuttaessa ikkunoiden ja kenttien välillä, jolloin liikkuminen nopeutuu. Kirjoittimeksi käy mikä tahansa MS-Windows-ohjaimella tuettu kirjoitin.
Ohjelma on englanninkielinen mutta helppokäyttöinen ja tehty Suomessa käyttäen Borland Pascal with Objects ohjelmointikieltä. Ohjelmaan voi tutustua Internetin kautta sivulla www.patlab.nickels.com tai www.nickels.fi ja kopioida täydellinen ohjelma, jota voi käyttää 20 kertaa; samalla selviää myös yhteensopivuus Win95 käyttöjärjestelmään.
Tämä ohjelma on tekijänoikeuslain alainen ja sen immateriaalioikeudet kuuluvat ohjelman kehittäjälle Nickels Oy:lle,
Asemank. 15 FIN-05900 Hyvinkää, fax. ja puh. 019-431373.

Ohjelman myynnissä noudatetaan seuraavia ehtoja:
-ohjelmalla saa olla korkeintaan 1 käyttäjä yhtä aikaa eli asiakkaalla on oikeus käyttää yhtä versiota HemoDiff-ohjelmaa kutakin lisenssisopimusta (käyttöoikeussopimusta) kohden.
-ohjelmaa ei saa kopioida tai luovuttaa vapaasti kolmannelle osapuolelle. Jos ohjelma luovutetaan kolmannelle osapuolelle, siirtyy myös ohjelman käyttöoikeus kolmannelle osapuolelle.
Ohjelman käyttäjä vastaa itse kaikista ohjelman käytöstä mahdollisesti aiheutuvista seuraamuksista.
Voit käyttää ohjelmaa joko 1) asettamalla levykkeen levykeasemaan tai 2) kopioimalla koko ohjelma tietokoneen kovalevylle. Kovalevylle asennettuna ohjelma toimii huomattavasti nopeammin.
Levykeasemalta (A:\) käynnistys: Aseta levyke asemaan ja kun olet Järjestelmänhallinnassa paina Tiedosto(File) > Suorita(Run) > ja kirjoita komentoriville a:hemo ja paina OK. Win95:ssä paina Käynnistä > Suorita > Selaa > Avaa Winbal napsauttamalla kuvaketta > A:\Winbal.exe > OK. Ohjelma kysyy ensimmäisellä käyttökerralla lisenssitunnusta, joka on jokaisella HemoDiff levykkeellä yksilöllinen. Saamasi levykkeen LISENSSITUNNUS (käyttöoikeussopimuksen numero) löytyy diskettikotelon kannesta. Kirjoita se kokonaisuudessaan (sekä pienet kirjaimet että numerot) esilletulevaan ruutuun.
Sitä kysytään ja se syötetään vain ensimmäisellä käynnistyskerralla, mutta voit tarvita sitä uudelleen, jos asennat ohjelman toiseen, omaan tietokoneeseen, joten älä hukkaa lisenssitunnusta. Jos kuitenkin hukkaat sen, saat uuden ilmoittamalla nimesi ja osoitteesi Nickels Oy:lle faksilla: 019-431373. Sinulla on oikeus ottaa yksi varmuuskopio levykkeestä ja asentaa ohjelma oman tietokoneesi kiintolevylle. Voit faksata kommentteja ja toiveita ohjelmasta samaan numeroon. Kommentit ovat ohjelman kehittämisen kannalta arvokkaita!
Voit luoda myös kuvakkeen Järjestelmänhallintaan, jolla ohjelma käynnistyy napsauttamalla hiirellä. Mene Tiedostonhallintaan >Tiedosto > Uusi > ohjelma/ohjelmaryhmä OK > ohjelman ominaisuudet > kirjoita komentoriville: c:\diff\hemo.exe > paina: vaihda kuvaketta > OK > OK. Saat seuraavan kuvakkeen, jota voit napsautaa käynnistääksesi ohjelman:
![]()
Win95:ssä saat kuvakkeen esille hiiren oikeanpuoleisella painikkeella Resurssienhallinnasta, jonka voit hiirellä siirtää työpöydän kansioon edelleen Resurssienhallinnassa, jolloin käynnistyskuvake tulee esille työpöydällä.
HemoDiff ohjelman käynnistyessä tulee ruudulle pääikkuna, josta siirrytään laskentaikkunoihin painamalla WBC-, MiniDiff-, Reticulocytes- ja Thrombocytes painikkeita tai käyttämällä Diff-menua valikkoriviltä. Academy-painikkeella pääset opinto- ja kertauskurssille.
Mukana on myös yksinkertainen laskin (MathCalculator) esim. tarkistuksia varten sekä pieni Help-ikkunapari.

Pääikkunaan kerätään laskennan tulokset tulostusta tai tallennusta varten. Voit tulostaa paperille painamalla PRINT-nappia tai valikosta File->Print. Voit tallentaa laskennan tuloksen kovalevylle tai levykkeelle painamalla SAVE-nappia tai valikolla File->Save ja vastaavasti avata vanhemman tiedoston OPEN-napilla.
Pääikkunassa et voi enää muokata tai muutella saamiasi tuloksia, vaan muutokset tehdään aina vastaavassa ali-ikkunassa (WBC, MiniDiff jne). Voit liikkua eri ikkunoissa paitsi hiiren avulla myös käyttämällä tabulaattoripainiketta eli sarkainnäppäintä sekä nuolinäppäimiä (Diff-menu). EXIT-näppäin sulkee ohjelman.
4b. Valkosolujen erittely (WBC-ikkuna)

Valkosolujen erittelyikkunaan päästään painamalla pääikkunan WBC-nappia tai Diff-menun kautta. Kuvassa on suoritettu 16 solun erittely ja käyty välillä KuvaGalleriassa (PictureGallery) hakemassa muistiapua tyypitykseen ja terminologiaan (esim. Elliptocytes, Tear cells, Hypogranulation). HELP-painikkeella on saatu esille näppäimistön solutyypit. Huomaa, että voit käyttää myös näppäimistön numeerista aluetta (numeric keypad) ns alfanumeerisen lisäksi. Voit merkitä painikkeet tarralla muistamisen helpottamiseksi tai käyttää oheista maskia.
Laskentaa varten on kursori siirrettävä yhteen Edit-ruuduista (0-50,51-100,101-150,151-200) tabulaattorilla tai hiirellä. Heti, kun kursori on edit-ruudussa, muuttuvat näppäimistön numerot 1-0 ja kirjaimet q sekä w vastaamaan jotakin solutyyppiä ja muut näppäimistön kirjaimet sulkeutuvat, jolloin virhelyönnit eliminoituvat. Voit nyt suorittaa erittelylaskennan painamalla jotakin edellämainituista muuttuneista näppäimistä ja voit korjata virheet askelpalauttimella. Voit korjata mistä kohtaa haluat mahdollisen virhesyötön. Muista poistaa molemmat kirjaimet (iso ja pieni), kun suoritat korjauksen.
Voit liikkua ruudun alueella paitsi hiiren myös tabulaattorin eli sarkainnäppäimen avulla.
Kun erittely on suoritettu saat %- ja kokonaissolumäärän painamalla RESULT-näppäintä. Yksilöi laskennan tulos (esim. potilaan nimi, näytteen numero, laskennan suorittaja, kommentit jne) täyttämällä Slide ID ja kommenttiruutu (Slide ID/remarks). Painamalla OK-näppäintä siirtyvät tiedot pääikkunaan. Ohjelma ei päästä sinua pääikkunaan, ellet ole painanut Result-näppäintä ja täyttänyt ID-ruutua; tämä siksi, että laskenta ei tuhoudu. Cancel-näppäin peruuttaa työn ja pääset pääikkunaan, jolloin myöskään mitään ei siirry pääikkunaan.
Usein törmäät erittelyssä erikoislöydöksiin ja tämän vuoksi sisältää Kuvagalleria (PictureGallery) sarjan solumuutoksia muistin virkistämiseksi. Painamalla PictureGallery for remarks-näppäintä WBC- tai MiniDiff-ikkunassa aukeaa viereinen kuvaruutu.
Ikkunaan on kerätty poikkeavia punasolu- ja valkosolutyyppejä. Painamalla solun vieressä olevaa neliötä tulevat valinnat esille punaisella korostettuna WBC- ta MiniDiff-ikkunaan, kun painat OK-näppäintä. WBC- ja MiniDiff-ikkunaan ilmestyy myös luettelo muista soluista harmailla kirjaimilla. Voit kirjoittaa löydöksen WBC- ja MiniDiff-ikkunan Slide ID and remarks-editointiruutuun, jolloin huomautus siirtyy pääikkunaan tulostusta ja/tai tallennusta varten.
MiniDiff-ikkunan päästään pääikkunasta painamalla MiniDiff-painiketta tai DIFF-menun kautta. Tässä ikkunassa eritellään liuskatumaiset leukosyytit, lymfosyytit ja mononukleaariset solut. Mukana on myös Diverse-painike jolla voit kerätä muita solutyyppejä. Muuten ikkuna toimii kuten WBC-ikkuna ja pääset myös täältä tutkimaan Kuvagalleriaa (PictureGallery) poikkeavien solujen tunnistamiseksi (katso yllä). Kuvassa on painettu HELP-painiketta, jolloin solukuvat tulevat esille ja lisäksi on suoritettu 30 solun erittely, painettu RESULT-näppäintä ja käyty myös kuvagalleriassa (PictureGallery) hakemassa tunnistusapua (Elliptocytes, Siderotic granul. Rouleaux) ja lopuksi myös täytetty Slide ID /remarks ruutu. Löydös on valmis siirrettäväksi pääikkunaan tulostusta ja/tai tallennusta varten, mutta luonnollisesti haluat jatkaa vähintään 100 solun erittelyllä, jonka voit tehdä ilman, että edelliset tulokset katoavat. Huomaa, että voit käyttää myös numeerista aluetta (numeric keypad). Voit merkitä painikkeet tarralla muistamisen helpottamiseksi tai käyttää oheista maskia.

Retikulosyytti-ikkunaan päästään pääikkunasta painamalla Reticulocytes-painiketta tai Diff-menun kautta. Kuvassa on esitetty kolme eri tapaa laskea retikulosyytit: kaksi tasaotantamenetelmää (balanced sampling) ja tavanomainen menetelmä. Kuvassa on painettu HELP-ruutuja hiirellä, jolloin lyhyt ohje on tullut esille kunkin metodin kohdalla. Ohjetekstin saat pois painamalla OK-kirjaimia ohjeruudun alaosassa hiirellä.
Ylimpänä on tasaotantamenetelmän syöttöruudukko, jossa lasketaan vähintään 100 retikulosyyttiä vähintään 30:stä kentästä. Laskeminen tapahtuu painamalla välilyöntipainiketta [RE] ja uuteen laskentakenttään (Ret1 - Ret10) siirrytään hiirellä tai tabulaattorilla (sarkainnäppäimellä). Kaikki punasolut lasketaan joka 10. näkökentästä. Retikulosyytti-% saadaan suoraan esille kuvaruutuun.
Keskimmäinen tasaotantamenetelmä käyttää ns Millerin okulaariruudukkoa (edellyttää ristikon asentamista mikroskoopin toiseen okulaariin), jossa kaikki retikulosyytit lasketaan suuresta neliöstä ja kaikki punasolut pienestä neliöstä. Retikulosyyttejä lasketaan vähintään 100 kpl. Huomaa erona edelliseen laskutapaan, että Millerin ruudukossa on ruutujen pinta-alojen suhde 1: 9, eli suuremman neliön pinta-ala on 9 kertaa suurempi kuin pienemmän, jolloin samoilla luvuilla saadaan hieman suurempi retikulosyytti% (kirjallisuutta: Laboratory Medicine vol 17: 742-744, 1986).
Kolmannessa menetelmässä on kyse ns tavanomaisesta laskentatavasta, joka on edellisiä epätarkempi. Siinä lasketaan retikulosyytit 1000 punasolua kohden. Kursori siirretään ensimmäiseen syöttö- eli edit-ruutuun [0..250] ja syöttö suoritetaan painamalla numeronäppäimiä 8(=R=retikulosyytti) ja 9(=E=erytrosyytti) ja kun 250 solua on laskettu siirrytään seuraavaan ruutuun [251..500] jne, kunnes 1000 solua on laskettu, jonka jälkeen painetaan RESULT-painiketta. Voit korjata virhesyötön edit-ruudussa backspace-näppäimellä eli askelpalauttimella. Voit käyttää myös ns numeerista aluetta (numeric keypad).
Kun laskenta on suoritettu on vielä yksilöitävä tulos täyttämällä Slide ID-ruutu (näytenumero), jonka jälkeen painetaan OK-näppäintä, jolloin päästään pääikkunaan tulostamaan ja tallentamaan tulos. Et pääse pääikkunaan, ellet ole täyttänyt ID-ruutua. Cancel-näppäin peruu kaikki tulokset ja pääset pääikkunaan, mutta menetät laskennan tuloksen.
Trombosyytti-ikkunaan päästään pääikkunasta painamalla Trombocytes-painiketta tai Diff-menun kautta. Kuvassa on painettu HELP-ruutuja hiirellä, jolloin lyhyt ohje on tullut esille ruudun vasempaan laitaan. Ohjeteksti saadaan pois painamalla hiirellä OK-kirjaimia ohjeruudun alaosassa.
Trombosyytit lasketaan yleensä kammiomenetelmällä (suora menetelmä), mutta voidaan laskea myös sivelyvalmisteesta (epäsuora menetelmä, kuten tässä, esim. Fonion mukaan). Trombosyyttien absoluuttinen määrä lasketaan senjälkeen kertomalla punasolujen määrä litraa kohden.Esimerkiksi, jos punasolujen määrä on 4,5 E12/l ja trombosyytti% on 14,16% (kuten kuvassa), niin trombosyyttien määrä litraa kohden on: 14,16/100x 4,5 E12/l = 0.6372 E12/l = 637,2 E9/l eli niiden määrä on kohonnut (esim. tulehduksen aiheuttama reaktiivinen trombosytoosi).
Kuvassa on siis laskettu trombosyyttien %-määrä punasoluja kohden sivelyvalmisteesta epäsuoralla menetelmällä (T=trombosyytti, E=erytrosyytti). Kursori siirretään hiirellä tai tabulaattorilla edit-ruudusta toiseen [0-250],[251-500] jne, kunnes noin tuhat punasolua on laskettu. Laskenta suoritetaan painamalla numeronäppäimiä 8=T ja 9=E. Laskennan aikana tai sen jälkeen painetaan RESULT-painiketta. Voit korjata virhelyönnit edit-ruudussa askelpalauttimella (backspace-näppäin). Voit käyttää myös numeerista aluetta (numeric keypad).
Kun laskenta on suoritettu on vielä yksilöitävä tulos täyttämällä Slide ID-ruutu (näytenumero), jonka jälkeen painetaan OK-näppäintä, jolloin päästään pääikkunaan tulostamaan ja tallentamaan tulos. Et pääse pääikkunaan, ellet ole täyttänyt ID-ruutua. Cancel-näppäin peruu kaikki tulokset ja pääset pääikkunaan, mutta menetät laskennan tuloksen.
Ohjelmassa on mukana erillinen opetus- ja kertausosa , DiffAcademy. Mukaan on otettu normaalilöydös, vasemmalle siirtyminen ja krooninen myeloinen leukemia ja valikoimassa on 20 yleisintä solu- ja alasolutyyppiä, joista voit tehdä erittelyn ruudulle ja verrata tulosta oikeaan. Jokaisen solun tiedot saat esille, kun napsautat hiirellä solua. Tiedot pysyvät esillä muutaman sekunnin, jonka jälkeen solu palaa kuvaruutuun. Tarkoituksena on käyttää näppäimistöä samalla periaatteella kuin varsinaisessa valkosolujen erittelyssä WBC-ikkunassa.
Laskenta aloitetaan napsauttamalla hiirellä (tai Alt+kirjain N,S tai L) valikkoa Normal diff, Shift to the left tai Leukemia, jolloin ruudulle ilmestyy 30 tai 40 solun ryhmä. Kukin soluryhmä vastaa jakaumaltaan kliinisessä työskentelyssä tavattavaa löydöstä. Siirrä kursori eli kohdistin Start-ruutuun, ja erittele solut esim. vasemmalta oikealle painamalla vastaavaa numeronäppäintä, kunnes kaikki solut on eritelty. Voit korjata askelpalauttimella virheet. Paina lopuksi RESULT-näppäintä, jolloin ruutuun ilmestyy oma tuloksesi ja oikea erittely. Prosenttiosuutta ei ilmoiteta. RESET-näppäin palauttaa alkutilanteen ja CLOSE-näppäimellä pääset takaisin pääikkunaan. HELP-painikkeella saat myös opastusta.